Caracterización del polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae serotipo 18C mediante la combinacion de metodos cromatograficos y RMN 1h

Abstract

Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae) es una bacteria encapsulada y el principal agente causal de enfermedades invasivas como neumonía, meningitis y otitis media aguda. La mayor incidencia de las enfermedades neumocóccicas tiene lugar en niños menores de cinco años, por la inmadurez de su sistema inmune, lo que le impide responder ante antígenos polisacarídicos. De los tres agentes bacterianos de mayor incidencia en la población infantil, el único que en Cuba no está cubierto por una vacuna es el S. pneumoniae. Por tal motivo, en el Centro de Química Biomolecular (CQB), en colaboración con el Instituto Finlay, se lleva a cabo el desarrollo de una vacuna conjugada multivalente con polisacáridos de S. pneumoniae, serotipos 1, 5, 6B, 14, 18C, 19F y 23F, a proteínas portadoras: toxoide tetánico o diftérico. Se necesita la combinación de diferentes métodos analíticos para evaluar los polisacáridos capsulares debido a su complejidad estructural. En el presente trabajo se realizó la caracterización de S. pneumoniae, serotipo 18C, mediante la combinación de la espectroscopía de Resonancia Magnética Nuclear protónica (RMN 1H) con diferentes métodos cromatográficos. La identidad del polisacárido se comprobó por RMN 1H. La determinación de la relación molar de los monosacáridos se realizó mediante cromatografía gas-líquido (CGL) y cromatografía líquida de alta resolución en fase reversa (RP/HPLC). Su composición estequiométrica correspondió con la reportada en un trabajo previo. La distribución del peso molecular se determinó mediante cromatografía líquida de alta resolución de exclusión molecular (HPSEC). La metodología propuesta puede extenderse al resto de los serotipos que componen.