Archivos Latinoamericanos de Nutrición (Mar 2000)
Estudio electroforético de las albúminas y globulinas de cuatro genotipos de Canavalia ensiformis
Abstract
Para el estudio de las albúminas y globulinas de semillas de Canavalia ensiformis, se utilizaron la electroforesis en gel discontinuo de poliacrilamida (PAGE) y la electroforesis en gel discontinuo de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (PAGE- SDS). En la PAGE, la concentración de acrilamida usada en el gel superior fue 4,0% con un pH de 6, 7 y en el gel inferior se utilizó 7,5% y 12,6% de acrilamida con un pH de 8,9. En la PAGE-SDS se empleó 4.4% de acrilamida con un pH de 6,8 en el gel superior y 7.5% Y 12.6% de acrilamida con un pH de 8,8 en el gel inferior. Los materiales estudiados fueron los genotipos venezolanos Tovar. Yaracuy. Original y U-O2. Las albúminas y globulinas fueron extraídas con solución de NaCl 0,5M y luego separadas por diálisis contra agua y liofilizadas. Estas fracciones proteicas representaron 84.85% de la proteína total de la semilla. Las albúminas fueron separadas en PAGE al 7,5% de acrilamida en cinco componentes y las globulinas en seis, siendo los patrones electroforéticos semejantes entre los genotipos analizados. Así mismo, los patrones PAGE al 10% de acrilamida fueron iguales en todos los genotipos, presentando las albúminas cinco bandas y las globulinas tres. Con PAGE-SDS al 7,5% de acrilamida, las albúminas fueron separadas hasta en ocho componentes y las globulinas hasta en siete bandas con movilidades entre 0.2981 y 0,9932. obteniéndose patrones diferentes para cada genotipo. Igualmente, los patrones PAGE-SDS al 12.6% de acrilamida fueron distintos para los genotipos, separándose las proteínas en mayor número de bandas. Las albúminas mostraron hasta veintiuna bandas con movilidades entre 0,2603 y 0.7398 y las globulinas hasta dieciséis bandas con movilidades entre 0.2454 y 0.7390. Los patrones PAGE de los genotipos de Canavalia ensiformis analizados no se distinguieron entre sí. En cambio con la PAGE-SDS se obtuvieron patrones electroforéticos distintos que variaron en el número e intensidad de las bandas, permitiendo diferenciar los genotipos estudiados. El peso molecular de las albúminas varió entre 76.000 y l2.000daltones y el de las globulinasentre 80.000 y 12.000 daltones.Electrophoretic study ofalbumins and globulinsof four genotypes of Canavalia ensiformis. Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and PAGE-SDS were used to study seed albumins and globulins of Canavalia ensiformis. In PAGE the concentration of acrylamide used in the upper gel was 4.0% with a pH of 6.7 and in the lower gel 7.5% and 10% of acrylamide were used with a pH of 8.9. In P AGE-SDS the concentration of acrylamide was 4.4% with a pH of 6.8 in the upper gel and 7 .5% and 12.6% with a pH of 8.8 in the lower gel. The material used were the Venezuelan genotypes Tovar. Yaracuy, Original and U-02. The albumins and globulins were extracted with a 0.5 M NaCI solution and then separated by dialysis against water and lyophilized. These protein fractions represented 84.85% of the total amount of protein in seeds. The albumins were separated in PAGE with 7.5% acrylamide into five fractions and globulins into six, with similar electrophoretic pattems between genotypes. In a similar manner, the patterns obtained in PAGE with 10% acrylamide were the same for all genotypes, showing five bands for albumins and three bands for globulins. With P AGE-SDS containing 7.5% of acrylamide, albumins were separated into as many as eight components, and globulins into as many as seven bands with mobilities between 0.2981 and 0.9932, with different pattems for each genotype. Also the pattems P AGE-SDS at 12.6% of acrylamide were different for the genotypes, separating proteins into a greater number of bands. The albumins showed as many as twcntyone bands with mobilities between 0.2603 and 0.7398, and globulins as many as sixteen bands with mobilities between 0.2454and 0.7390. The P AGE pattems of the genotypes analyzed did not show differences between them. However, with PAGE-SDS different electrophoretic pattems were obtained which varied in the number and intensity of the bands, making it possible to distinguish the genotypes studied. The molecular weight of the albumins varied between 76.000 and 12,000 daltons and of the globulins between 80,000 and 12,000 daltons.
