Estandarización de un método citoquímico con microscopía electrónica para detectar actividad enzimática en células completas

Abstract

Mediante métodos de citoquímica ultraestructural, se localizó la actividad de ATPasa de Caz+ en membranas de eritrocitos humanos tanto normales como invadidos por Plasmodium falciparum. Para detectar la actividad de esta ATPasa se utilizó un método directo de precipitación con metales pesados, en donde el plomo o el cerio forman un precipitado electrodenso con el fosfato libre, producto de hidrólisis de la enzima, sobre la supeficie de dichas membranas. Este método utiliza un medio de incubación que contiene todos los elementos necesarios para que se desarrolle la reacción enzimática e incluye herramientas bioquímicas, tales como, inhibidores tanto de la ATPasa como de calmodulina que permiten confirmar la especificidad de laactividad deATPasa de Caz+ en un estudio bioquímico con citoquímica ultraestructural.