Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban (Jan 2020)
多巴胺受体4对肝癌细胞增殖转移的影响及预后
Abstract
【目的】探讨多巴胺受体4（DRD4）在肝细胞癌组织以及癌旁组织的表达，分析其表达情况与肝癌术后患者预后相关临床病理因素的关系和预后意义；探讨DRD4 激动剂PD-168077 以及阻滞剂L-745870 对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响，并分析其可能的机制。【方法】通过免疫组化以及实时定量PCR（qPCR）技术检测肝 癌以及癌旁组织 DRD4 蛋白和 mRNA 表达情况，并分析 DRD4 表达的预后意义；采用 Cell Counting Kit 8（CCK8） 和 Transwell 实验检测 PD-168077 以及 L-745870 对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用，蛋白免疫印迹（Western blot）技术检测信号通路蛋白，并使用通路抑制剂验证。【结果】在196 例肝癌组织中有85 例（43.4%）有DRD4 蛋白高表达，在74 对肝癌以及非癌组织中，非癌组织的DRD4 mRNA 高表达，非肝癌细胞株Miha 表达较肝癌细胞系高； DRD4 高表达患者包括无复发生存期（RFS）和总生存期（OS）较长，并且DRD4 是肝癌切除术后患者RFS 和OS 的独立预后因素（P<0.05）；PD-168077 显著抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭，并呈剂量依赖性（P<0.05），而1 nmol/L浓度的 L-745870 能显著增强肝癌细胞增殖、迁移和侵袭（P<0.05）；PD-168077 抑制 ERK 蛋白的磷酸化，而L-745870 则可促进ERK 蛋白的磷酸化，ERK 抑制剂PD98059 可以逆转L-745870 的作用。【结论】DRD4 高表达的患者预后较好，有可能成为预测肝癌术后患者预后的分子标志物；DRD4 可能成为肝癌治疗的潜在靶点。
