PERFIL SECRETORIO DAS CÉLULAS MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES EM MODELO ANIMAL DE NEOPLASIA MIELOPROLIFERATIVA PH-

Abstract

Introdução: As neoplasias mieloproliferativas (NMP) são doenças hematopoéticas clonais adquiridas, caracterizadas por aumento das células maduras e precursoras orieundas de uma ou mais linhagens mieloides. Apesar dos conhecimentos acumulados, sobre a patogênese das NMPs, na última década, ainda há necessidade de esclarecer os mecanismos celulares e moleculares que participam da fisiopatologia e progressão desse grupo de doenças, incluindo alterações do nicho hematopoético (microambiente) da medula óssea (do inglês, Bone marrow microenvironment - BMM). O microambiente estromal da medula óssea é composto por matriz extracelular e células especializadas, com destaque para as células mesenquimais multipotentes (MSC), que além da participação em processos fisiológicos, está ainda associada ao aumento anormal das redes vasculares e imunomodulação do nicho hematopoético em neoplasias hematológicas. Objetivo: Avaliar o perfil secretório das MSC da medula óssea de modelo animal de NMP. Metodologia: Os animais controles e JAK2V617F+ foram eutanasiados em diferentes tempos de vida (8, 32, 56 e 80 semanas) para obtenção das MSC. As MSC foram caracterizadas quanto ao imunofenotipo, capacidade de diferenciação e perfil secretório. A Análise de citocinas, quimiocinas, fatores de crescimento e angiogênicos foi realizada pela técnica do multiplex. Resultados: No painel imunofenotípico, foram usados os marcadores anti-CD45- anti-CD31- anti-CD34- anti-CD90+ e anti-SCA1+ confirmando a pureza e o isolamento das MSC. A capacidade das células mesenquimais estromais, isoladas da medula óssea dos animais controle e NMP, de se diferenciarem em osteoblastos foi similar. Nossos dados mostraram, que os animais JAK2V617F+, nos dias da eutanásia, apresentavam número elevado de glóbulos vermelhos, alta concentração de hemoglobina e alta porcentagem do hematócrito. Estes parâmetros hematológicos indicaram que a NMP desenvolvida no modelo animal tem maior similaridade com os parâmetros hematologicos de pacientes com Policitemia Vera. As MSC dos animais modelos de NMP foram capazes de secretar mais Angiopoietina 2, CXCL10, IL-10, IL-1a, CCL3, CCL11 e G-CSF do que os animais controles. Em contraste, as MSC dos animais com NMP secretaram menos CCL2, IL-6 e M-CSF do que o grupo controle. Discussão: Estes resultados mostraram que as MSC dos animais com NMP apresentam perfil secretório distinto das MSC normais. Tais alterações provavelmente contribuem para a desregulação do nicho hematopoético dos camundongos com NMP. Conclusão: Estes resultados indicam a potencial contribuição das MSC, por meio da secreção de mediadores solúveis, na patogênese das neoplasias mieloproliferativas. *IEGP e MCC contribuíram igualmente para este trabalho. Apoio financeiro: Capes (Numero/Projeto 1); FAPESP 2018/19714-7 e FAPESP 2021/06841-3. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (#2018/005-1: ).