<b>PADRONIZAÇÃO DA TÉCNICA DE PCR NA DETECÇÃO DE <i>Mycobacterium bovis</i> DIRETAMENTE NO LEITE</b>

Abstract

<p class="MsoNormal" style="margin: 0cm 0cm 0pt; line-height: normal; text-align: justify; mso-layout-grid-align: none;"> O leite é importante como fonte nutricional ao homem, bem como possível via de transmissão de micobactérias, principalmente de <i>Mycobacterium bovis</i>. Neste estudo padronizou-se uma técnica de PCR eficaz para detectar, diretamente no leite, o <i>M. bovis</i>. Para tal, leite tipo A foi inoculado artificialmente com número conhecido de <i>M. bovis</i> AN5, e diluições sucessivas foram submetidas a dois protocolos de PCR para avaliar o limite de detecção de <i>M. bovis</i>. Em um dos protocolos foi empregado o par de <i>primers</i> INS1 e INS2 para detecção do <i>Mycobacterium</i> spp e no outro, o JB21 e JB22 específico para <i>M. bovis</i>. As diluições foram também semeadas no meio de Stonebrink e estes incubados por até 90 dias a 37^°C, para determinar o número de bacilos viáveis inoculados no leite. Pelos resultados de PCR, o protocolo empregando o par de <i>primer</i> INS1 e INS2 foi menos sensível detectando bacilos até a diluição 10^-3 (800 UFC/mL). O par JB-21 e JB-22 detectou <i>M. bovis</i> até a diluição 10^-4 (80 UFC/ mL), sendo portanto mais sensível. Este método pode servir como ferramenta diagnóstica de <i>M. bovis</i> em amostras de leite. </p>

Keywords

• Leite
• tuberculose bovina
• Mycobacterium bovis
• PCR
• diagnóstico.