Seleção de primers para análise de inter simple sequence repeats na cultivar ‘Itália’ de Vitis vinífera L.

Abstract

No presente estudo o objetivo foi selecionar primers ISSR (Inter-Simple Sequence Repeats), adequados para futuros estudos de variabilidade genética em plantas da cultivar ‘Itália’ (Vitis vinifera L.). Além disso, padronizar o método de quantificação de ADN (Ácido Desoxirribonucleico) e a reação de PCR para os primers selecionados. Para extração do ADN foram utilizadas amostras de folhas jovens de videira coletadas na região de Marialva, PR, e o método de quantificação do ADN escolhido foi o espectrofotômetro Picodrop®. Os primers selecionados por apresentarem um número satisfatório de bandas nítidas (106 no total) em gel de agarose 2% quando submetidos à eletroforese, foram: ISSR-1, ISSR-2, ISSR-5, ISSR-6, ISSR-7, ISSR-8, ISSR-9, ISSR-11, ISSR-12, ISSR-13, ISSR-14 e ISSR-15, usando uma temperatura para ligação dos primers de 50 °C na PCR. O número médio de bandas por primer foi de 8,84, sendo o ISSR-5 o que gerou uma maior quantidade (13) de regiões ISSR amplificadas.

Keywords

• eletroforese
• biologia vegetal
• issr
• uva