Boletín de la Sociedad Argentina de Botánica (Dec 2009)
Comparación de condiciones de cultivo para el aislamiento y recuento simultáneo de levaduras de suelos de bosques nativos de Nothofagus spp. (Fagaceae) de la Patagonia Argentina Comparison of culture conditions for isolation and count of soil yeasts from Nothofagus spp. (Fagaceae) native forest of Argentinean Patagonia
Abstract
Se compararon las condiciones de cultivo para aislar y contar levaduras del suelo de los bosques nativos de Nothofagus spp. en la Patagonia de Argentina. En este trabajo se propone la utilización de medios de cultivo adicionados con Rosa de Bengala 25 >g/mL y 200 >g/mL de Cloranfenicol. En estas condiciones se obtuvieron recuentos de levaduras que rondan 10³ UFC/g de suelo (aproximadamente 4% de la flora microbiana detectada). Se compararon los resultados de aislamientos por el método enriquecimiento-remoción utilizando las condiciones sin-enriquecimiento y con-enriquecimiento. Las levaduras aisladas fueron clasificadas en 7 grupos por características morfológicas y fisiológicas. Utilizando la técnica de MSP-PCR se obtuvieron 10 perfiles de bandas diferentes, que indicarían la presencia de al menos 10 especies en el suelo. La obtención de perfiles de bandas diferentes en los ensayos sin-enriquecimiento y con-enriquecimiento revelan la necesidad de utilizar estas dos formas de cultivo de manera complementaria para la recuperación de otras cepas, inhibidas o subestimadas por el cultivo directo sin-enriquecimiento.This research proposes the use of culture medium added with 25 >g/mL of Rose Bengal and 200 >g/mL of Chloramphenicol. Under these culture conditions the yeast counts were about 10³ CFU/g of soil (approximately 4% of detected microflora). Isolation with and without a previous enrichment step was compared. Isolated yeasts were classified into 7 groups based on morphological and physiological characteristics. 10 different banding patterns were observed using MSP-PCR technique, which indicate the presences of at least 10 species. Different banding pattern was observed between cultures with and without enrichment, this revealed the need of using both isolation techniques in a complementary way to recover strains inhibited or underestimated by direct non-enrichment methods.
